技术领域
本发明涉及一种中药提取方法，具体涉及一种高纯度黄连碱的提取方法。属于中药提取技术领域。
背景技术
黄连碱是中药黄连的特征性成分，是一种浅黄色针状结晶(乙醇)，极略微溶于水，微溶于乙醇。黄连碱有抗微生物活性，其抗卡尔酵母菌的效力比小檗碱、巴马汀以及非洲防己碱都强，其还有杀虫活性，诱导神经细胞分化，对胃粘膜有保护作用，抗癌作用，平滑肌松弛作用以及抗肾炎作用等等。临床实践发现，高纯度的黄连碱安全性更高，一般的黄连碱粗品有可能导致肝功升高等安全性问题。
但是现有的黄连碱提取工艺技术复杂，所得黄连碱的纯度也不理想。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种高纯度黄连碱的提取方法。
为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)将预处理的黄连加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至35～45℃，浸泡处理12～24小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：8～10mL；
(2)升温至50～80℃，保温提取2～3小时，提取2～3次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝5～6，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤2～3次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/10～1/15，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及5～10g/mL的氯化钠溶液，10～20℃放置50～80小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤2～3次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15～20w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，10～20℃放置50～100小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤2～3次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：2～3：0.4～0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流20～30分钟，然后降温至-5～-8℃，静置析晶，过滤，洗涤，干燥，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：5～8mL。
优选的，步骤(1)中黄连的预处理包括除去泥沙、粉碎或者切丝。
优选的，步骤(5)中静置析晶的时间为5～8小时。
优选的，步骤(5)中的干燥条件为60～80℃干燥12～24小时。
本发明的有益效果：
本发明先将黄连于硫酸溶液中加热浸泡处理，然后继续升温提取，经过第一次过滤和第二次过滤，加入盐酸以及氯化钠溶液，处理一段时间后再进行第三次过滤，接着用硫酸溶液和硫酸钾溶液将黄连碱沉淀出来，最后用乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液进行重结晶提纯，可以高收率得到高纯度的黄连碱。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步的阐述，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。
实施例1：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至35℃，浸泡处理12小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：8mL；
(2)升温至50℃，保温提取2小时，提取2次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝5，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤2次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/10，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及5g/mL的氯化钠溶液，10℃放置50小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤2次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，10℃放置50小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤2次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：2：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流20分钟，然后降温至-5℃，静置析晶5小时，过滤，洗涤，60℃干燥12小时，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：5mL。
实施例2：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至45℃，浸泡处理24小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：10mL；
(2)升温至80℃，保温提取3小时，提取3次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝6，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤3次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/15，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及10g/mL的氯化钠溶液，20℃放置80小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤3次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和20w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，20℃放置100小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤3次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：3：0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流30分钟，然后降温至-8℃，静置析晶8小时，过滤，洗涤，80℃干燥24小时，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：8mL。
实施例3：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至35℃，浸泡处理24小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：8mL；
(2)升温至80℃，保温提取2小时，提取3次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝5，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤3次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/10，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及10g/mL的氯化钠溶液，10℃放置80小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤2次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和20w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，10℃放置100小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤2次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：3：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流30分钟，然后降温至-5℃，静置析晶8小时，过滤，洗涤，60℃干燥24小时，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：5mL。
实施例4：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至45℃，浸泡处理12小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：10mL；
(2)升温至50℃，保温提取3小时，提取2次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝6，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤2次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/15，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及5g/mL的氯化钠溶液，20℃放置50小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤3次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，20℃放置50小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤3次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：2：0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流20分钟，然后降温至-8℃，静置析晶5小时，过滤，洗涤，80℃干燥12小时，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：8mL。
实施例5：
一种高纯度黄连碱的提取方法，具体步骤如下：
(1)黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升温至40℃，浸泡处理18小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：9mL；
(2)升温至60℃，保温提取2.5小时，提取2次，合并提取液，第一次过滤，所得第一滤液用氢氧化钙调节至pH＝5，再进行第二次过滤，得第二滤液和第二滤渣，后者用水洗涤2次，得第二洗涤液，并将第二洗涤液与第二滤液合并，减压浓缩至原体积的1/12，得浓缩液；
(3)向浓缩液中加入0.2mol/L的盐酸以及8g/mL的氯化钠溶液，15℃放置60小时，第三次过滤，得第三滤液和第三滤渣，后者用水洗涤2次，得第三洗涤液，并将第三洗涤液和第三滤液合并；
(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和18w.t.％硫酸钾溶液，充分搅拌后，15℃放置80小时，第四次过滤，得第四滤液和第四滤渣，后者用水洗涤3次，即为黄连碱粗品；
(5)将黄连碱粗品溶于体积比为1：2.5：0.5的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流25分钟，然后降温至-6℃，静置析晶6小时，过滤，洗涤，70℃干燥18小时，即得高纯度黄连碱，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：6mL。
对比例1
一种黄连碱的提取方法，步骤(5)的方法是：将黄连碱粗品溶于体积比为1：2.5的乙醇-水混合溶液中，加热回流25分钟，然后降温至-6℃，静置析晶6小时，过滤，洗涤，70℃干燥18小时，即得，其中，黄连碱粗品与乙醇-水混合溶液的质量体积比为1g：6mL。其余同实施例5。
对比例2
一种黄连碱的提取方法，步骤(5)的方法是：将黄连碱粗品溶于体积比为1：2.5：1的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流25分钟，然后降温至-6℃，静置析晶6小时，过滤，洗涤，70℃干燥18小时，即得，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：6mL。其余同实施例5。
对比例3
一种黄连碱的提取方法，步骤(5)的方法是：将黄连碱粗品溶于体积比为1：2.5：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加热回流25分钟，然后降温至-6℃，静置析晶6小时，过滤，洗涤，70℃干燥18小时，即得，其中，黄连碱粗品与乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的质量体积比为1g：6mL。其余同实施例5。
对比例4
一种黄连碱的提取方法，步骤(1)的方法是：黄连除去泥沙、粉碎或者切丝，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，浸泡处理18小时，黄连与硫酸溶液的质量体积比为1g：9mL。其余同实施例5。
试验例
通过HPLC检测实施例1～5以及对比例1～4最终所得黄连碱产品中黄连碱的实际含量，即产品纯度，并计算黄连碱收率，结果见表1。
表1.黄连碱产品纯度
从表1可以看出，实施例1～5的黄连碱收率高，产品中黄连碱含量也高，而对比例1使用了乙醇-水混合溶液进行重结晶，对比例2和对比例3使用的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中乙酸乙酯的含量分别偏高或偏低，所得产品的纯度明显偏低，说明本发明使用的重结晶溶剂提纯效果更佳；对比例4直接用硫酸溶液浸泡(不加热)，所得产品的收率明显偏低，说明有效成分提取不充分。
上述虽然对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。
